乙肝病毒HBV耐药突变检测服务
－Pyrosequencing焦磷酸测序技术
全面检测 - 可检测所有核苷(酸)类似物耐药位点
准确定量 - 可准确检测突变株与野生株比例
灵 敏 - 检测灵敏度为103 copies / ml
快 速 - 一个工作日即可完成检测任务
PyrosequencingTM焦磷酸测序技术原理
PyrosequencingTM焦磷酸测序技术是一种基于四种酶（DNA聚合酶、硫酸化酶、荧光素酶和双磷酸酶）的级联反应来进行定量序列分析的技术。在整个反应体系中，以PCR产物的一条单链为模板，与测序引物退火结合后，按照事先计算好的顺序将四种dNTP依次加到样品中。
如果加入的这种dNTP与测序引物3’下游+1位所对应的模板链上的碱基互补，就会发生上图所示的一系列酶的级联反应：
第1步：DNA聚合酶催化该dNTP掺入到引物链中，并释放出与掺入碱基等摩尔数的焦磷酸基团PPi。
第2步：硫酸化酶催化APS和PPi形成等摩尔数的ATP。
第3步：ATP驱动荧光素酶介导的荧光素向氧化态转化，并发出与ATP量成正比的可见光信号。
第4步：光信号由仪器检测到并以荧光信号峰的方式反映在结果图中。图中横坐标代表所加入dNTP的种类及顺序，纵坐标所示峰的高度即光信号强度，与反应中掺入的核苷酸数目成正比。
第5步：ATP和未掺入的dNTP由双磷酸酶降解，淬灭光信号，并再生反应体系。然后就可以加入下一种dNTP，进行下一轮反应。
如果加入的这种dNTP不能够互补掺入，则直接被双磷酸酶降解，反应体系再生并进入下一轮。结果图中相应的位置也就表现为无光信号（峰）了。
随着以上过程的循环进行，互补DNA链合成并延伸，即可根据结果图读取DNA序列了。通过信号峰的有无判断碱基的种类，峰高则可以判断连续掺入的碱基的数目，或是对群体样本中不同基因型所占的比例加以定量。
SNP分析结果图（YIDD变异）
乙肝病毒HBV耐药突变检测
检测必要性
研究表明，乙肝患者长期服用抗病毒药物如拉米夫定、阿德福韦、恩替卡韦等，会导致HBV产生不同程度的耐药突变率。因此及时监测HBV变异水平，对于指导临床合理用药，具有重要参考价值。
技术优势：
1.定 量
特有的基因频率分析，混合感染时可准确检测出耐药位点突变株和野生株的比例。
（野生型A占60.1％ 突变型G占39.9％）
2.准确灵敏
测序引物紧靠待测位点，最大限度降低了测序过程中引入突变的可能性；
采用基于引物延伸的直接测序法，是突变检测的“金标准”；
检测灵敏度为103 copies / ml。
3.快 速
从血清样本制备到最后的数据分析，只需一天时间就可完成整个检测过程。
4.全面检测
我们的检测涵盖了目前FDA批准用于治疗乙肝病毒的所有核苷（酸）类似物耐药突变相关位点，可检测药物包括拉米夫定（贺普丁）、阿德福韦（贺维力）、恩替卡韦（博路定）、替比夫定（素比伏）、恩曲他滨和替诺福韦，可检测位点包括：
1) I169T突变（恩替卡韦耐药相关）
2) V173L突变 (拉米夫定和恩曲他滨耐药相关)
3) L180M突变 (拉米夫定/替比夫定/恩曲他滨/恩替卡韦耐药相关)
4) A181V/T突变 (阿德福韦耐药相关)
5) T184G突变 (恩替卡韦耐药相关)
6) A194T突变（替诺福韦耐药相关）
7) S202I突变（恩替卡韦耐药相关）
8) M204V/I突变（YMDD突变，拉米夫定/替比夫定/恩曲他滨/恩替卡韦耐药相关）
9) N236T突变 (阿德福韦耐药相关)
10) M250V突变（恩替卡韦耐药相关）
订货信息：
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货号 |
产品名称 |
产品说明 |
包装 |
| 122-301-S |
乙型肝炎病毒耐药突变检测服务 |
同时检测10个位点，检测药物包括拉米夫定(贺普丁)、
阿德福韦(贺维力)、恩替卡韦(博路定)、替比夫定
(素比伏)、恩曲他滨和替诺福韦 |
1人份 |
| 122-302-S |
拉米夫定耐药突变检测服务(即YMDD) |
检测2个位点（180＋204） |
1人份 |
| 122-303-S |
阿德福韦耐药突变检测服务 |
检测2个位点（181＋236） |
1人份 |
| 122-304-S |
拉米夫定＋阿德福韦耐药突变检测服务 |
检测4个位点（180＋181＋204＋236） |
1人份 |
